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背刺高手—比色杯交叉污染

来源:北京安图发布时间:2026年01月04日
背刺高手
比色杯交叉污染

随着检验仪器检测速度的不断提升,工作效率显著提高,但全自动生化分析仪因其核心部件的重复使用,以及多项目共检的工作模式,天然存在交叉污染风险,由此引发的交叉污染问题将影响检测结果,进而影响临床诊断准确性,最终可能延误患者治疗时机,对患者健康、家庭经济乃至社会医疗资源造成多重负担。

交叉污染种类与污染部件有很多,如试剂针、搅拌杆、比色杯清洗等等, 其中试剂针、搅拌杆等原因较容易解决,只需要改变测试顺序、定期擦拭或增加特殊清洗即可,增加样本针、试剂针特殊清洗只需要几秒钟冲洗时间,而设置比色杯特殊清洗会影响整体测试逻辑,对仪器速度造成极大影响,且比色杯交叉污染具有极强隐秘性与随机性,易与试剂稳定性、仪器精密度等指标混淆,最为难发现与解决。仪器关机前会自动执行比色杯清洗,次日早上开机时会再次执行比色杯清洗,此时比色杯经过两轮清洗,洁净程度较高,检测结果相对正常,故早上质控良好,前面数十例标本无异常,此时大多数操作者会放松警惕,审核报告时容易进入不深入思考的固化操作模式,比色杯交叉污染恰恰是在标本检测一段时间后(即比色杯被循环使用)出现,像极了早上开机对使用者满面微笑,但在不久后就开始背刺的伪装高手。如何揪出比色杯交叉污染较为复杂,为方便理解,本实验以800速生化仪为例,旨在如何查找试剂交叉污染的来源、种类以及设置特殊清洗等措施解决交叉污染。

易受比色杯交叉污染的项目有TBA、Ca、Mg等,以TBA为例,早上质控结果良好,前面十几例标本结果正常或与临床体征相符,中间发现部分肝功能正常人群TBA明显偏高,或与临床不吻合情况,抽部分偏高样本进行复查,结果明显下降,如是试剂针、搅拌杆等因素,假阳性情况通常会从一开始就出现,而不是仪器运行一段时间后出现,解决分析步骤:

01
确定仪器无硬件故障

确定仪器无硬件故障,且正常维护保养,光度计、比色杯吸光度等均在正常范围内。

02
仪器停机后执行清洗

仪器停机后执行清洗1-2次,取健康人混合血清,单独连续测定TBA 20次,精密度良好,排除重复性差导致。

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03
排除样本针、试剂针、搅拌杆、干燥棒等交叉污染

排除样本针、试剂针、搅拌杆、干燥棒等交叉污染:将TBA加样顺序设置在组合末端,即最后加样,选择肝功能+TBA,肾功能+TBA,血脂+TBA,心肌酶+TBA,离子组合+TBA,初步判断污染源属于哪个组合。

TBA组合污染源排查表

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从结果确定样本针、试剂针、搅拌杆、干燥棒清洗充分,未给TBA带来交叉污染。

04
鉴别反应产物导致的比色杯造成的交叉污染

以某800速生化仪为例,该仪器160个比色杯,在测试完160个项目后开始循环使用清洗过的杯子,假设生化仪上开展项目30项,取复合血清测所有项目,此时杯子使用了30个,为消耗掉后续130个比色杯,可选择成本较低的项目,如TP等,也可取水替代试剂,连续测定该项目130次,共消耗比色杯160个,此时仪器开始循环使用清洗过的比色杯,开始测定混合血清TBA 30次,所使用的杯子号与一开始测定生化项目的30个杯子完全相同,该实验必须一次性编辑好所有测试,确保320个测试连续进行,样本针中途停顿将导致比色杯未按计划清洗使用。第一圈比色杯使用完后,第二圈比色杯前面30个项目全部检测TBA ,实验杯号与TBA相同杯号相同生化项目对TBA的结果如下表:


比色杯第一轮结果:

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此时160个比色杯使用完毕,标本号从161开始使用1号比色杯

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结论:当TG项目使用过的比色杯清洗不彻底时再被用于测定TBA会造成正干扰。

分析:胆酸钠是一种常用的表面活性剂,在生化试剂中具有乳化作用。甘油三酯在血液中通常与脂蛋白结合存在,以乳糜微粒、极低密度脂蛋白等形式分散在血浆中。胆酸钠能够帮助分散这些脂蛋白,使甘油三酯和胆固醇从脂蛋白中释放出来,便于后续试剂中的酶与底物充分接触并发生反应,从而提高检测的灵敏度和准确性。所以部分厂家生产的甘油三酯生化试剂会添加胆酸钠来促进检测反应的进行。目前国内试剂厂家普遍使用该方法学,试剂组分中一般都含有胆酸钠,在比色杯清洗不完全时极易对TBA造成正干扰。

方案:为使比色杯清洗得更彻底可以增加清洗次数,比如从八阶清洗增加为九阶清洗等,但是增加清洗步骤会带来更复杂的机械机构、耗材增加等负面影响。

目前生化仪一般为塑料杯或者玻璃杯,二者各有优劣势,为保证结果更可靠高速仪器通常采用玻璃杯,玻璃比色杯制作工艺如下图:


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拼接工艺缺陷:


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长时间使用后,比色杯清洗难度加大,增加比色杯携带污染概率。

安图B2000系列独特的斜截面杯底设计,佳能FX8在采用U型杯底设计,二者均为一体成型,做到无拼接缝,让杯底更容易清洗,最大程度减少比色杯交叉污染。


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各种品牌的生化仪加样本、试剂程序,搅拌方式,清洗方式不同,样本针、搅拌杆材料、涂层不同,易造成交叉污染的仪器部件也不同,在整体结果良好,偶尔出现个别样本异常时,还需结合样本内源性干扰、试剂成分、酸碱度、离子强度、硬件状况等因素,通过一系列系统的实验,逐个排除找出原因。


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